化学实验--奶粉中蛋白质的提取,
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:化学作业 时间:2024/05/12 18:57:00
化学实验--奶粉中蛋白质的提取,
我们实习要做的实验,就像实验报告一样,有实验原理,试剂,方法什么的,马上就要要
我们实习要做的实验,就像实验报告一样,有实验原理,试剂,方法什么的,马上就要要
我们以前用牛奶做的,奶粉应该差不多吧,就提取个酪蛋白
原理:牛乳中主要蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L.酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的PH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来.用乙醇洗涤沉淀物,除去脂质杂质后便可得到纯酪蛋白.
试剂
牛奶 ,体积分数95%乙醇1200ml,无水乙醚1200ml,0.2mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml(先配置A液和B液)
A液(0.2mol/L醋酸钠溶液):称NaAc·3H2O 54.44g,定容2000ml
B液(0.2mol/L醋酸溶液):称优级纯醋酸(含量大于99.8%)12g,定容至1000ml
取A液1770Ml,B液1230ml,混合既得PH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml
操作
1,将100ml牛奶加热至40℃,在搅拌下慢慢假如预热至40℃、PH4.7的醋酸缓冲溶液,用精密PH试纸或酸度计调PH至4.7.将上述悬浮液冷却至室温.离心15min(3000r/min),弃去上清夜,得酪蛋白粗制品(或用细布过滤,收集沉淀)
2,用水洗沉淀3次,离心10min(3000r/min),弃去上清夜
3,在沉淀中加入30ml体积分数95%乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽虑,用乙醇-乙醚混合液(乙醇和乙醚按1:1等体积混合)2000ml洗沉淀2次,最后用乙醚洗沉淀2次,抽干.
4,将沉淀摊开在表面皿上,风干,得酪蛋白纯品
原理:牛乳中主要蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L.酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的PH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来.用乙醇洗涤沉淀物,除去脂质杂质后便可得到纯酪蛋白.
试剂
牛奶 ,体积分数95%乙醇1200ml,无水乙醚1200ml,0.2mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml(先配置A液和B液)
A液(0.2mol/L醋酸钠溶液):称NaAc·3H2O 54.44g,定容2000ml
B液(0.2mol/L醋酸溶液):称优级纯醋酸(含量大于99.8%)12g,定容至1000ml
取A液1770Ml,B液1230ml,混合既得PH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml
操作
1,将100ml牛奶加热至40℃,在搅拌下慢慢假如预热至40℃、PH4.7的醋酸缓冲溶液,用精密PH试纸或酸度计调PH至4.7.将上述悬浮液冷却至室温.离心15min(3000r/min),弃去上清夜,得酪蛋白粗制品(或用细布过滤,收集沉淀)
2,用水洗沉淀3次,离心10min(3000r/min),弃去上清夜
3,在沉淀中加入30ml体积分数95%乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽虑,用乙醇-乙醚混合液(乙醇和乙醚按1:1等体积混合)2000ml洗沉淀2次,最后用乙醚洗沉淀2次,抽干.
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