为什么我用基因组提取试剂盒提出来的DNA含量特别少而且还跑不出胶来?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/23 16:10:23

先帮你分析实验问题,最后再说试剂盒是否有问题.
1、DNA提取问题：现在核算提取试剂盒大部分都是吸附柱法,相信你应该不会操作错误,如果提取之后进行核酸定量结果很低的话,试着再最后一步溶解核算的时候把水稍微加温（37℃就可以了）,溶解时间稍微长一些,然后再离心的时候采用分次离心,比如开始你用200ul溶解的话,你可以分两次用100ul水溶解离心,这样可以提高DNA的产率.
2、电泳问题：如果你核酸定量浓度不低的话就考虑电泳问题,电泳的时候加上1kb的marker,如果marker跑不出来说明你凝胶有问题,一般只要marker跑出来了,DNA浓度又比较高,而没有条带这样的现象很少见,DNA提取比较简单而且相当稳定,本人当时做甲基化提取的DNA有一次拿出来电泳忘了放回冰箱了,结果大夏天的在外面放了一天,心怀忐忑的进行了一次电泳,结果条带依然给力,一点都没有降解.
也不知道你的具体情况,稍微给你分析一下,有不对的地方希望大家多多指正,
再问：为什么我的PCR也什么东东都跑不出来呢？只有MARKER的条带孤零零的在上面，用内参的时候就跑出来而目的就什么都没有
再答：首先内参能跑出来说明模板应该没有问题，如果这样的话有可能是你的引物不合适。而且还有一个问题，内参基因容易扩增，在一些列温度梯度内应该都很好扩，但是目的就不一定了，有可能是引物不合适、有可能是温度不合适、还有可能是你的目的基因属于低丰度表达，模板量较少，问题很多，还得你自己好好摸索摸索，你可以尝试控制单一变量，有结果咱们再讨论。

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