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由mRNA-cDNA复合体合成cDNA为什么需要RNA酶?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/13 12:05:51
由mRNA-cDNA复合体合成cDNA为什么需要RNA酶?
同题.
为什么要合成mRNA?不是再合成一条DNA单链就可以了吗?
确实需要RNA酶,但是RNA酶的作用是水解RNA不是合成mRNA~
cDNA文库的建立流程:
提取mRNA——cDNA第一条链的合成——cDNA第二条链的合成——cDNA末端处理
cDNA第一条链的合成:在这一步里,只需要逆转录酶(依赖RNA的DNA聚合酶),以mRNA为模板合成DNA.这一步里最忌有RNA酶了(要不然就没有模板了!这一步最后生成mRNA-cDNA复合体
cDNA第二条链的合成:这个时候就是你问题里由mRNA-cDNA复合体合成cDNA了.这个时候是用DNA聚合酶以DNA为模板~最后就得到双链DNA了,就是我们要的cDNA!
所以你的问题就解决了吧:要用RNA酶把mRNA水解掉,然后DNA聚合酶才能结合到模板上,聚合生成DNA~