大鼠的肺组织做western前怎么处理,我的其中要检测的蛋白有磷酸化的,需要加磷酸酶抑制剂吗?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/06 03:52:24

液氮冷冻然后研磨成粉末然后按细胞提取蛋白步骤处理即可就是加裂解液然后95°煮10分钟再加Loading buffer
需要加磷酸化酶抑制剂
再问：能具体一些吗，我第一次裂解组织从未做过实验。希望您可以吧裂解液和组织的比例，还有磷酸酶抑制剂的用量，以及煮蛋白和buffer的比例告诉我，好吗，谢谢！
再答：没有称过组织多重哎反正就是很小很小一块最终大概弄成300ul的量各加多少就得看你每个试剂是多少X的了
再问：如果是1g的组织，我应该用多少各种液体啊，谢谢！裂解组织需要加原凡酸钠吗？
再答：之前做没有称过所以你就配成300ul最终就可以了大概200ul的1X的裂解液，100ul 3X的loading buffer，没加过那个如果你看什么文献上有加的也可以加吧

用western blot做磷酸化蛋白的测定需要注意哪些问题磷酸化蛋白指的是什么?怎么知道自己做的蛋白是磷酸化蛋白? 做磷酸化蛋白WB,提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂影响大么想检测磷酸化的蛋白,这个磷酸的位点,怎么选择? mRNA和蛋白水平的检测有什么相关性和区别?做过蛋白水平检测的还需要做mRNA水平检测吗?mRNA水平检测意义已知大鼠脑组织中蛋白质的DNA序列,如何设计实验,克隆大鼠的基因并得到重组蛋白 western检测融合蛋白中mGM-csf的一抗二抗具体怎么选择? 进出肝脏的血管分布,求细解,我要做大鼠肝门静脉插管,需要了解血管分布,才能知道此手术对于大鼠肝脏的为什么同样的蛋白在两次western blot检测中蛋白量相差那么大啊? 测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪? 镍柱纯化能否影响蛋白的磷酸化关于动物实验中涉及炎症反应时,需要购买的抗体与蛋白是指什么,在做western、免疫组化时其什么作用、怎么区分