请问,用HPLC外标法给物质定量时,先测不同浓度标准溶液,再测待测物溶液.每次都要做标准曲线吗?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/10 12:48:21
请问,用HPLC外标法给物质定量时,先测不同浓度标准溶液,再测待测物溶液.每次都要做标准曲线吗?
还有,茶黄素包括四种单体,我测出每种单体的标准曲线,还有必要测茶黄素复合物标样吗?
静等回复!
外标法,标准品跟待测品,先测哪个有严格的要求吗?复合标样的各个峰可以完全分开,待测品在这个液相条件下不一定完全分开呀?标准品跟待测品的液相条件可以有稍微的不同吧?
还有,茶黄素包括四种单体,我测出每种单体的标准曲线,还有必要测茶黄素复合物标样吗?
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外标法,标准品跟待测品,先测哪个有严格的要求吗?复合标样的各个峰可以完全分开,待测品在这个液相条件下不一定完全分开呀?标准品跟待测品的液相条件可以有稍微的不同吧?
严格的做,每次都需要做标准曲线.不严格的话,色谱条件没变(仪器,柱子,溶剂配比)的情况下可以不是每次都做标准曲线.不过,最好用一已知浓度的样品先进样,看计算得出的浓度是否超出你的允许范围,偏差小的话,然后再做未知样品.
后面一个问题,如果色谱比较好,分零度大于2,就不用测复合物标准样品了.
对于问题补充:
我个人认为,进样针洗干净的情况下,标准品和待测品进样先后无所谓.
但是一般都是先用待测品摸分离条件,至少要将待测组分完全分开才行,否则都是浮云.
条件确定后,一般先测标准品,以验证系统是否正常.
因为是外标法,最好条件完全一样,否则误差的几率增大,内标法好些,但原则上是相同条件.
后面一个问题,如果色谱比较好,分零度大于2,就不用测复合物标准样品了.
对于问题补充:
我个人认为,进样针洗干净的情况下,标准品和待测品进样先后无所谓.
但是一般都是先用待测品摸分离条件,至少要将待测组分完全分开才行,否则都是浮云.
条件确定后,一般先测标准品,以验证系统是否正常.
因为是外标法,最好条件完全一样,否则误差的几率增大,内标法好些,但原则上是相同条件.
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