western检测蛋白降解

血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分,含量为60～80g/L,血浆蛋白质种类繁多,功能各异.用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类.　　最初用盐析法只是将血浆蛋白分为白蛋白和球蛋白,后来用分段盐析法

只看marker也不可靠吧?还是用ponseauS（丽春红）给膜上的蛋白质显色看一下到底如何.另外膜上没有marker的话,胶上还看得到marker吗?如果还在胶上,那么蛋白质可能也还在胶上,可以改变

免疫印迹如果结合凝胶成像的话（带相关分析软件）,他是可以定量的,但多用来做体外培养的细胞；免疫组化就是针对组织切片的,可以定性、半定量（即看出个大小的关系）.如果你要是做动物实验组织的话,最专业也是最

有很多种方法,以下列举几种：1,蛋白磷酸酶活力检测（kinaseactivityassay）2,利用专一的磷酸根抗体（phospho-specificantibody）3,西方墨点法或蛋白质印渍法（W

看你的flag抗体是否有问题,我是做抗体生产的,原来开发flag抗体时就会对其进行C端、N端、M端的Qc检测,正常情况下三端都需要有识别,我担心你的抗flag抗体有可能不识别N端,还有一种可能就是你的

一抗要抗小鼠要适合做western二抗要抗一抗,要有HRP不知道你的什么融合蛋白,你也可以抗你融合上去的tag.

erk1/2就表示erk1+erk2分子量分别42,44.也有的抗体只识别其中之一.一般情况下磷酸化不会导致蛋白分子量增加.具体看抗体说明书.CREB容易出两条带原因是CREB和另外一个蛋白同源性太高

将细胞平板取出置于冰上,用PBS洗两次,加入200μl预冷细胞裂解液,短暂孵育后用细胞刮子刮下细胞,将细胞碎片及裂解液移入1.5mlEP管中,冰上孵育20分钟,期间漩涡振荡3次,于4℃离心12000r

分子量很小的多肽不适合,比方说就十几个氨基酸的；当然分子量太大了也不好做,比方说好几百KD的.

泛素－蛋白酶体系统是细胞内蛋白质降解的主要途径,参与细胞内80%以上蛋白质的降解.您好,答题不易如有帮助请采纳,谢谢!

当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开.然后两块膜分别与内参蛋白抗

还是挺贵的,主要需要如下设备：电源（电泳和电转可以通用）；电泳槽（随设备会送几盒电泳薄板和厚板）；电转槽；以上三个在一起国产的需要1万块,进口的需要几万.最贵的是扫描仪,无论是红外扫描还是化学发光一般

当然是ELISA好了,ELISA在科研上主要用于定量,而Westernblot主要用于定性,当然,根据灰度可以半定量,但这个准确性就差很多了,还有免疫组化,这个是用于定位的.免疫学三大工具,免疫组化、

1.westernblot每孔上样总量15-50ug大部分蛋白能做出来,跟蛋白质表达量、分子量、抗体效价都密切相关.2.组织一般取200mg,匀浆后蛋白常能得到几百ug,跑十块胶足够.

煮沸时间不够使得蛋白质变性不充分或者形成二聚体会导致实验效果不好,煮过头的情况我也没有遇到过（貌似还没有碰到人煮个5-10分钟还会煮成一小时的--|||）,不过肯定的是变性已经充分.可以试一试,当然也

30是指内参上样量是30微克的情况下,具体上多少就是多少.灰度值差异很大,所以不能直接用来分析.要分析就是用比值分析.用比值来分析比较下实验组和对照组就可以避免出现绝对灰度值.

取决于蛋白降解的程度,如果不完全降解,出来的条带肯定会很暗；如果完全降解了,根本就没条带

看你的蛋白样品是纯度很高的单一条带样品还是未经纯化较多杂带的样品.如果是单一条带的样品10微克的上样量就足够了,如果是细胞裂解液这样的样品可以提高一些上样量30~80微克的样子.Western-blo

个人认为：1加样量的变化2一抗二抗的浓度变化以及其洗脱时间的影响3曝光时间（影响最大）

1,通过电镜或X-射线衍射等方法对其结构进行分析.2,功能分析：检测能否与其受体或配体结合.3,酶解法再问：请问能详细解释下吗，多谢了再答：蛋白在电场中的迁移速率与其所带电荷以及分子量大小有关，设计实