RNA提取异丙醇过量
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/16 14:07:50
高中生物必修2中有DNA的粗提取实验,你可以去看看.DNA:1.实验材料必须准备充足.本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得.每组(2个学生)需用5mL鸡血细胞液,则每班(50人)
RNA在冷的无水乙醇里溶解度低而蛋白溶解度高因此可以用冷的无水乙醇把RNA沉淀下来从而达到提纯的目的.
提RNA加TRIZOL室温静置5分钟再加氯仿4°离心15分钟去上层澄清相再加异丙醇-20放置30分钟然后4°离心10分钟倒掉液体加酒精4°离心5分钟然后倒掉酒精晾干加DEPC水溶解
漂洗各种盐离子,沉淀核酸.
中国农业大学的,我们都是用广州健仑生物科技有限公司的的产品,
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提问的女孩2011-1-13因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况(比如你的实验)可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,
、组织样品采集1.首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号.2.准确切除所需组织.3.离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型
氯仿抽提蛋白异丙醇沉淀RNA乙醇洗掉DNA
由于液氮温度很低,用液氮来冷冻组织可以快速地达到低温,防止组织被破坏.
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
首先要把病毒的外壳蛋白质去掉可以使用蛋白酶再问:怎么检测提取的质量?跑胶吗?再答:这个超出所学范围不懂不好意思
厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1mlTrizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10╳106个细胞加1mlTrizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡
可以用液氮先研磨酵母,然后再用相关的RNA提取试剂盒提取,可以电泳鉴定提取效果,或是测OD值.
一般加入10-20微升,室温反应10-20分钟即可.RNA酶蛋白质在后续变性沉淀,洗脱时即可去除.
变浑浊吧,变成白色沉淀啦.是dna和少量蛋白质析出.
异丙醇是沉淀核酸用的,作用和乙醇一样.只不过用量少一点,0.6V~1V就够了,不像乙醇沉淀需要至少2V,一般需要2.5倍体积.在水相很多,离心管容积有限,加不下太多乙醇的时候一般会用异丙醇沉淀.异丙醇
Trizol法应该是专门开发出来提取RNA的,但是这个方法用来提取DNA,蛋白效果也很好,你所说的完整性,提取DNA的时候,只要不剧烈振荡,应该还是很好的.给你几个公司的报价:invitrogen公司
因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况(比如你的实验)可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,沉淀照样超多.
氯仿抽提蛋白异丙醇沉淀RNA乙醇洗掉DNA