作业帮pcr缓冲液中金属离子的作用
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/23 20:49:07
同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深
镁离子在酶催化过程中,结合到酶－底物结合体上,从而使催化反应的活化能更加降低.使得反应能够进行.
你用的试剂盒吗?缓冲是调ph的,蛋白酶分解蛋白,EDTA是螯合二价离子,失活DNA酶,SDS是裂解细胞,变性蛋白用的,TE缓冲和STE缓冲大概是试剂盒里面的,改变DNA与硅胶亲和力的.这个名字不同的试
10xPCRbuffer:500mMKCl100mMTris-HCl(pH8.3)15mMMgCl2Somehas(NH4)2SO4aswell.dependsonthecompany
一般PCR使用两条引物,前后各一条,与模版DNA结合上后,前后的引物形成复制起始位点,共同向中间扩增,直到连上,一次扩增完成.
DNA上样缓冲液里有SDS吗?一般只是EDTA,甘油和溴酚蓝啊.如果加SDS问题也不大,估计是能将样品里可能含有的DNA结合蛋白给变性解离了吧.DNA带强负电,与SDS不会结合的.
基本常识PCR包括7种基本成分：模板DNA、特异性引物、热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸（dNTP）、二价阳离子、缓冲液及一价阳离子.其中缓冲液：一般使用Tris-Cl缓冲液,标准的为10mmol/
PCR,即链式酶聚合反应,反应管中各组分如下：扩增缓冲液：缓冲液有助于酶的稳定,是给聚合酶提供一个最适合酶催化反应条件；4种dNTP混合物：四种脱氧核苷酸,是DNA的原料；引物：DNA合成不能从零开始
是的啊,可以用PCR产物做模板再PCR一次.再问：那是用PCR反应体系中PCR产物做吗还是需要把PCR产物提纯后再重新加入PCR反应体系这种二次PCR效果怎么样十分感谢再答：是啊，可以不用提纯的，因为
1mg2+是很多酶活性中心所必需的,pcr里的taq酶就需要它.2人工种子经历脱分化,人工种子是用脱分化后产生的包壁细胞再分化后的产生的3胰岛素来自胰岛β细胞
Taq酶,DNA0聚合酶,引物和模板结合后,Taq酶把一个个碱基加到你的引物后面（当然是和的模板链配对的碱基）~
加入DMSO利于减少DNA的二级结构,使G、C含量高的模板易于完全变性,在反应体系中加入DMSO使PCR产物直接测序更易进行.
1.酶不同：PCR中,聚合酶是以DNA为模板的DNA聚合酶.RT-PCR中,逆转录酶是以RNA为模板的DNA聚合酶.2.缓冲体系不同：由于聚合酶不同,两者相应的反应buffer（RB）也略有不同.因为
一小段寡聚的DNA,一般有两个（一对）,分为上游引物和下游引物,分别指导DNA两条链的聚合.它们主要作用有两个,一个是和模板特异性结合来指导taq聚合酶合成所要的片段.一个是提供一个3‘端的－OH末端
TISAB的作用是1调节pH,2掩蔽干扰离子3调节离子强度
Mg离子的作用主要是dNTP-Mg与核酸骨架相互作用并能影响Polymerase的活性,一般的情况下Mg的浓度在0.5-5mM之间调整,同样要记住的是在调整了dNTPs的浓度后要相应的调整Mg离子的浓
童鞋你画个图就明白了,这两句话没有矛盾啊.延伸方向是5端到3端,即是说新加的碱基要往3端添加不是吗?
洗脱非特异性吸附
主要成分是：NaCl,Tris－HCl（PH＝8）,EDTA（PH＝8）,SDS.NaCl,Tris－HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度hjEDTA主要是二价金属离子的螯合剂3173使影响
缓冲液有聚合酶需要的镁离子,还可以使反应体系处于酶反应时适合的PH,实际上就是给酶创造一个最适合的反应环境以使它的活性能达到最佳状态,如果你不加buffer,酶是没有活性的.一般酶和缓冲液是配套的,买