PCR技术要求反应体系中,要有一种与目的基因互补的DNA引物链

标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加双或三蒸水至10

在PCR技术中,需要有两种分别与两条DNA链互补的RNA引物,不是DNA链,而且一般都是两种.再问：与DNA互补为什么是RNA引物呢？是因为一种引物只能只能向一个方向延伸吗？再答：其实，DNA引物也可

PCR-RFLP是聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性分析的简称.是在PCR和DNA序列分析基础上产生的RFLP技术.该方法是通过PCR扩增一段DNA片段,然后再选择适当的限制性内切酶,消化PCR

在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea

模板1-100ng引物1（10uM）0.1-0.5uM引物2（10uM）0.1-0.5uMdNTP(10mM)1mM聚合酶5-10U聚合酶缓冲液(10*)10倍稀释水补足所需体积

楼上说的挺有道理,一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,50ul或者小体系25多做几管；如果仅仅是为了检测目的条带的话就可以做小体系的如

随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.

根据各试剂的终浓度来确定自己添加量,至于究竟应该用多大的体系我认为要根据自己的情况来确定,常用的有20,25,50等体系.建议参考别人的文献,一般做基因克隆的文章都会写反应体系,每种试剂用量.

模板,引物,聚合酶,原料加温度循环的条件

解题思路：PCR依据DNA复制的原理，要求熟悉DNA复制的过程及其特点。解题过程：解析：以模板DNA的两条链合成的子代DNA，只含有引物I或者引物II，其他的DNA同时含有引物I和引物II，所以含有引

不会脱落,因为引物的组分就是普通核酸,没必要让它再脱掉.PCR不像在生物体内一样,中没有那种降解酶H.要是有特殊要求的可能要脱.

我帮你BS一楼.问反应体系,他给黏贴PCR的概念.PCR反应体系,简单的说,就是PCR管子里所有东西的混合溶液,就是溶解有引物、模板DNA、游离碱基、Taq酶、甘油等等的水溶液.

首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的

循环中的延伸步骤实际上是让taq聚合酶开始合成DNA,taq聚合酶是高温活性酶,在72度的时候合成DNA.如果是循环结束后的5～10分钟终延伸,它的作用实际上是起到一个补偿作用,有时候你循环过程中的延

PCR体系就是指一定比例的PCR要素（水、引物、酶、镁、dNTP、模板）的混合物.常用的体系有10微升、20微升、25微升、50微升等.通常小体系用于检测、分析,而大体系用于回收PCR产物.但是要注意

这个比较简单,其实你买Taq中就有反应体系,其实这个体系都是公司的人大量实验做出来的,我们实验室现在用Takra的Taq酶,体系就按说明书加的,不过体系是50ul的,我们把所有都减半做了25ul体系就

从两条引物Tm看,退火温度大致在52~57℃左右.在这个范围内做下温度梯度.标准PCR体系就可以.ps：引物有些偏长.

典型程序：94℃,5min;(94℃,30s；55℃,30s；72℃,1min)x30；72℃,5min.典型体系：10Xbuffer（含Mg2+）,5ul；2.5mMdNTP,2ul；10uMpri

如果你的实验室对pcr反应体系已摸索很清楚,就不用换反应体系,没有扩出dna可能跟你的操作有关,你可以做个阳性对照,就可以知道是否是体系的问题,一般实验条件体系摸索的很清楚的实验室,体系一般不会有问题

20uM引物浓度指得是引物workingsolution的浓度.也就是说,当你从装有引物的管内,吸取一定量,加入到PCRmastermix配成反应混合液的时候,这个引物管内的浓度是20uM.如果1ul