PCR产物稀释40倍

没错.还要记得每次取上一级溶液的移液管或移液枪（的枪头）要换新的,就是说最后只用一次,要不然下一级溶液的稀释度会不够.

按理来说是不影响的,因为loadingbuffer里面主要是染料和比水重的成分,这样方便跑胶.你要是不放心的话就把产物都跑胶了,然后利用胶回收试剂盒来做.

首先你要有你目的产物和测序的DNA序列在网页最下端第二行有AligntwosequencesusingBLAST(bl2seq),点击进入看到有Sequence1和Sequence2,这里面分别输入你

在PCR的优化开始阶段,应用新的DNA模板,引物或热稳定DNA聚合酶等材料建立的PCR方法,其扩增效果一般总不是最佳的.这种PCR反应通常要求尽量抑制非特异性扩增和（或）增加目的DNA产物的产率.表1

1纳摩尔（nmol）=1000皮摩尔（pmol）9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答：加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没

使用标准浓度内参.

当然可以的.

博凌科为的这款产品是同类产品中比较不错的.它是在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去

PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使

是的啊,可以用PCR产物做模板再PCR一次.再问：那是用PCR反应体系中PCR产物做吗还是需要把PCR产物提纯后再重新加入PCR反应体系这种二次PCR效果怎么样十分感谢再答：是啊，可以不用提纯的，因为

如果不是精确算法的话,液体稀释10倍就是去1份100毫升的高浓度液体加入9份900毫升稀释液,定容或者也可以不定容（依照你的精确度来看）；如果定容的话就是定容至1000毫升.粉末状固体物质稀释十倍就是

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能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性

恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.

原理：是来至于双脱氧链终止法——现在应用最多的核酸测序技术,由Sanger等1977年提出：模板经过测序PCR反应后形成3'末端带有荧光标记（早期用同位素标记）的相差一个碱基的不同长度的产物,再根据每

博凌科为-为你稀释无问题.第二次的引物是内引物吗?第一次的产物含有目的条带吗?试过touchdown吗?每次都做温度梯度了吗?

如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的.选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以（

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应

你需要保存多久?我最多放过两三天,没问题再问：我周三晚上扩增出来的，结果给忘记放冰箱了，刚刚才放进去，后边要做DGGE，还可以用么？再答：不好意思DGGE实验我没有操作过。但是从理论上来说，2天不会降