LB培养基倒平板后如何加氨苄
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 04:11:08
要先将培养基和平板灭菌,然后融化培养基倒平板
保藏方法很简单,找个保鲜袋,将平板放入,手动将袋内空气尽量排空,然后把袋口打结,放在4℃冰箱或者冷库里都行,切记要保持倒置的状态,这样水分就不会蒸发或者挥发的太快,通常可以放置1个月左右.
lb培养基由蛋白胨,酵母膏,nacl组成.首先,蛋白胨是经过胰酶处理过的蛋白,处理后,大分子的蛋白分子量变小,细菌更容易利用,此外,还含有嘌呤,提供生长因子.如要培养大肠杆菌,其实用普通蛋白胨代替胰蛋
这个名字来源於英语的lysogenybroth,即溶菌肉汤
温度高,则水蒸气也多,所以你倒过的平板,盖子上都是水蒸气,如果你需要加入血清或者抗生素,那么高温会造成变性;低温的话,在烧瓶里面就结块了,倒出来的培养基都是不均匀的
只要不太烫手就行,注意操作,手要抓在底部,抓住瓶口不好倒,尤其是大的锥形瓶(杠杆原理).如果不好掌握,有时忘了就凝固住了,也可以拿块布垫着瓶底.我性子急经常就是这样.
温度太高会让抗生素失效,温度太低则会在你没倒完之前就凝固在瓶子里了.
一般来说,平板倒置,4度放置,即使不加任何抗生素,一个月内也不会长任何菌.假如你的灭菌没问题(空平板,固体培养基都是湿热灭菌),操作规范.应该不会长菌.根据你的描述来看,你加抗生素带入菌的可能性很大.
最好重新配置如果实在不行,用微孔滤膜过滤后加入用微波炉加热融化的培养基但这样不太好,因为营养会很大损耗
把琼脂培养基倒入玻璃平皿,冷却凝固后成固体培养基就叫平板
是防止过多的冷凝水形成.过热的时候到平板,会在培养基表面形成大量冷凝水,影响使用.
你说的好抽象这种实验很多但是加腺苷或者磷酸的我没做过SUP的意思是离心后的上清PBS是一种溶液,×PBS意思是几乘有1×5×10×等等
要是凝固了还怎么倒啊,肯定不能等凝固,要趁热倒.
可以将平板放到培养箱或者烘箱里,温度调到35~40(不能培养菌)比较容易干.注意不要放得太久容易将培养基放干.还有,倒平板前要将平板烘干,倒好后要方成一排,除了第一层容易产生水蒸气的冷凝水.但是要注意
应该先灭菌,再倒平板,之后平板冷却琼脂凝固,再倒置.平板就是我们要用的培养基,已经倒进去了还怎么消毒呢?倒进平板时,要保证平板和培养基都处于无菌状态,这样冷却之后才不会受到杂菌污染.
可能原因有三点:1、融化后的培养基温度较高,不经冷却就倒入冷的平板中,则会产生水汽和水滴附着表面壁上,甚至融液的溅出,影响涂布效果.2、培养基温度过高,在倾倒培养液时烫手,同样影响实验的顺利操作.3、
配制每升培养基,应该在950ml去液态LB培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl10g摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi
我刚从实验室配完回来,1000ml蒸馏水体系,10g胰蛋白胨,5g酵母粉,10g氯化钠,如果要固体培养基就再加15g琼脂粉
经常做实验的平时就是说“倒平板”,其实就是做固体平板培养基.习惯而已,方便称呼.
温度太高容易产生冷凝水,在涂布时,如果有水滴下来的话,会形成菌苔,不易计数.温度太低培养基容易凝固,如果倒出的培养基有凝块的话,有些实验是会导致失败的,如噬菌体的效价.一般刚配好的培养基可以放冷水下面