作业帮实时定量引物只能在基因内部吗
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/25 11:39:50
引物加的量应该相同,能放在一管里跑最好,但是分开跑也可以接收（一般都是这样）
你的realtimePCR扩增的是cDNA啊,因此用CDS序列啊.
请用primerexpress设计就行.你想去找非常保守的区域设计引物?可以,那你把这个物种的所有亚种的此段DNA序列做一个保守型分析就行.一般来说clustalX就可以了.再问：ClustalX排列
小说的文字有很多都不是最准确的,既然上面写的是“实时”,那么就应该是实时荧光定量PCR,否则普通PCR做不到“实时”.所以是一回事.
参照以下real-timePCR引物设计原则：1.最好位于编码区5’端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment软件看看结果.2.产物不能形成二级结构（自由能小于58.61KJ
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能
有的可以通用,但是大多数的时候不能,需要重新设计,我公司可以带你设计引物,如果在我公司订购试剂,可以免费设计,南京骥骜生物,电话：025-84865584,
1纳摩尔（nmol）=1000皮摩尔（pmol）9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答：加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没
建议你还是选择CDS区不一样的地方设计引物吧,这样可以避免交叉污染引起的非特异扩增,扩增的序列长度不一定要一样,每个引物你最好设计两三对,然后做一个相对定量看看不同引物的扩增效率,选择比较好的两对引物
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通
看家基因的意思是稳定表达的一种基因所以他的作用就是用来做内参比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基
把两个目的基因引物浓度和内参引物调成一致的,因为在计算结果时是要和内参基因对比的.
实时定量PCR是靠检测CT值（就是达到检测阈的循环数）从而测定原组织内mRNA量的实验手段.通过和标准曲线比对,可以精确知道原组织中某基因转录产物mRNA的量,从而对表达强度等进行分析.
这是由你设计的引物决定,一般控制在200bp以下为佳.包括你要检测的目的基因,设计的片段长度也控制在200bp以内.保证扩增效率较为一致.
一般的RT-PCR引物是不能用来做是实时荧光定量的的引物的,但是你可以设计出兼顾二者的引物,除了要注意一般引物设计的原则外,愚见认为还要注意下两个问题：
是的,这几个都是定量pcr.因为它能实时检测,所以又叫实时定量pcr.末端标记说的是它探针末端标记有检测基团
还是可以用的.不过现在SYBRGREEN的方法已经逐渐被淘汰了,建议换用probe-primer的方法.因为SYBRGREEN的结合是非特异性的,越长越容易出现错误.
模板大多数为一条,也可为多条,引物至少两个（三五处复制）启动与终止各一个为模板上公用.
可以,不过要用TaqMan法