作业帮在提取质粒过程中酚:氯仿:异戊醇
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/27 23:05:04
我也想知道,找了一下:酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质
非本人原创,转载自网络.认真看.质粒提取需要注意的提到了.溶液I,50mM葡萄糖/25mMTris-Cl/10mMEDTA,pH8.0；溶液II,0.2NNaOH/1%SDS；溶液III,3M醋酸钾/
首先加入溶液1,：改变细胞膜的通透性.加入溶液2：使细胞裂解,释放出质粒DNA和染色体DNA,在碱性条件下,破坏碱基配对,使这两种DNA都变性.加入溶液3：使DNA分子复性.此时,线状染色体DNA的两
提取的话有专用的试剂盒（就是可以购买的快速完成特定实验的东西）,也有很详细的步骤,主要是配好几个溶液挨个来就行了,基本上就是破膜,然后清除掉其他东西最后把DNA溶解在TE溶液里接下来使用酶切试剂酶切,
酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质刚期末考完居然有人问……要再过一星期我就回答不出来了555
提取DNA时候用的是TRIS饱和酚.提取RNA时候用的是水饱和酚.
碱液直接萃取出咖啡因,再用氯仿从水溶液中提取咖啡因,最后蒸馏溶剂,得到咖啡因
我们是沉淀溶于TER（TE含RNaseA20μg/ml）,37℃水浴30min.
氯仿-异戊醇能使蛋白质变性,从而将蛋白质从溶液中析出.
首先要知道,质粒是共价,闭合,环状的DNA（cccDNA）.以常用的碱裂解法为例：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒的cccDNA分子能够迅速复性,呈溶
限制酶连接酶作用于磷酸二子键
用酚氯仿再次抽提.若对去除基因组DNA有要求,那么用核酸外切酶处理.再问：能不能再详细点？？？谢谢
加完氯仿是用异丙醇析出RNA,我们是用75%的乙醇（用DEPC水来配）洗涤,乙醇是去各种离子的,无水乙醇不能去除离子,洗完之后一定要完全晾干,然后加入适量的DEPC水,在60度中水浴,直至溶解,如果部
酚:氯仿:的目的是沉淀蛋白质原理如下：酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性过离心,变性蛋白质的密度比水的密
碱性条件下,染色体DNA双螺旋结构解开而变性,质粒DNA的氢键断裂但两条互补链彼此缠绕.恢复中性时,染色体DNA难以复性,质粒DNA分子很快复性,离心时染色体DNA与细胞碎片一起被沉淀出来,而质粒DN
如何遗传?重组质粒,即基因载体.是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传（如线粒体、叶绿体等）.如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质
1.提取过程应尽量保持低温.2.提取质粒DNA过程中除去蛋白很重要,采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好,要将蛋白尽量除干净需多次抽提.3.沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低温条件下放置时间稍长可使
首先告诉你：酚和氯仿/异戊醇不是提取DNA方法,只是除杂的溶液!常见问题就是除杂不彻底,除杂过程导致DNA断裂.我做实验,材料里蛋白不太多不用苯酚,氯仿：异戊醇24:1就可以了.操作中一定要把溶液混匀
以东盛生物的为例bufferP1：除去RNAbufferP2：裂解细胞bufferP3：沉淀DNAbufferWA、bufferWB：都是洗涤液（这两个之间有什么区别我也不清楚）TE：溶解DNA.
按步骤操作完就在离心管里了