作业帮农杆菌感受态的制备为什么要加Nacl
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/18 01:00:50
因为纳米材料的比表面积大,粒子之间的作用力大,处于不稳定的能很大.
质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问：嗯，载体上没有通用引物，我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢，本
楼上别扯了,那是为了让细胞膜流动性降低,利于DNA的结合,同时使细胞暂停生长,维持在对数生长期的高活性!
1.你到底是感受态没制备好呢?还是转化了,但平板上没克隆呢?2.你转一个有人转成功过的试试,排除感受态和你自己操作是不是有问题?3.你用的是哪种菌啊?LBA4404?GV3101?3抗有没有+错啊?4
1、将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟.2、弃去上清,用预冷的0.05mol/L的CaCl2溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g
应该是保持内的渗透压,保持细胞的正常形态,因为na和cl是细胞物质运输的重要离子
平板计数琼脂（platecountagar,PCA）培养基成分胰蛋白胨5.0g酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000mL加热溶解调配好后高压蒸汽灭菌即可使用了
你这个环己酮是不是从环己醇,用重铬酸钠氧化得来的啊.如果是,草酸是用来quenchreaction的,就是把剩余的重铬酸钠反应掉.不然的话,副反应可能会发生,就是把环己酮继续氧化成一个二羧酸的产物吧.
问题不大,再用预冷CaCl2悬浮即可.
这问题要详细讲起来牵涉到很多其他概念,不知道你的基础如何,我试着归纳一下主要原因吧先回答第二个问题,用对数期细菌因为对数期细胞生长旺盛,新生细胞壁薄,细胞膜通透性好,外源DNA容易进入,同时意味着各种
温育就是让感受态回复一下状态,以及一些相关抗性基因的表达,毕竟从-80的环境中取出,需要一段时间适应,然后方可转化.
这属于专业问题啦下面的简单方案是Clhen等(1972)所用方法的变通方案,常用于成批制备感受态细菌,这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生5x106-2x107个转化菌落,这样的转化效率足以满足所有在
1.将冻存的菌种1：100接种于3ml的LB液体培养基中,37℃摇床过夜震荡培养.2.取1ml活化菌种接种于100mlLB培养基中,37℃摇床培养1.5-2h.3.将菌种在冰上放置10min.4℃、4
氯化钙法（CalciumChloride）本方法适用于批量制备大肠杆菌感受态细胞,所得感受态细胞可以获得5x106到2x107转化克隆/微克超螺旋质粒DNA材料（MATERIALS）缓冲液和溶液（Bu
感受态细胞你先用稳定浓度的高纯质粒测一下效率,如果达不到10的5次方就别用了.如果效率挺高有6或7次方而转化子不多,那么就和你构建的质粒有关了.制备感受态,一个要快,二要一直保持细胞在冷冻状态,所有e
原核细胞正常状态不会主动吸收质粒载体,在感受态时细胞膜通透性增加,通过热击或电穿孔技术使载体进入细胞
你直接拿没有切的质粒去转化涂板看有没有长如果长了就是连接的问题如果没长就是感受态的问题
第一,质粒转化感受态细胞时,只需要一定量的质粒完成转化即可,因此没必要使用高浓度的质粒.第二,质粒是环状的,浓度过高会使得发生断裂,聚集等.第三,浓度过高,溶液比较粘稠,不利于扩散.
除了增加细胞通透性之外,第一次还有洗净之前一步残留的LB液体的作用
双子叶植物吸引农杆菌,是因为农杆菌可以分泌生长素类似物,可以让植物体受伤处形成愈伤组织,始植物快速恢复.再问：不是说会引发冠瘿瘤吗，植物会死亡吗？农杆菌到底是好的还是坏的呢？再答：应该是正负效应都有吧