克隆到一条cDNA序列和gDNA序列 可以做什么
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/18 16:49:31
cDNA不是被克隆出来的,而是mRNA反转录出来的.你现在要做的是克隆编码区全场,而不是cDNA.如果你有反转好的cDNA,序列也已知的话,直接在3'和5'非翻译区设计引物,以cDNA为模板,克隆出全
你得到的cDNA的量是很少的,先放在克隆载体上是为了获得更多的你所需要的cDNA,这样做的话不至于在做完实验后突然发现你要的那个cDNA被你用完了,然后你又要重新再去很复杂的提取
基因文库分为基因组文库和部分基因文库,基因组文库包括了生物的全部基因,部分基因文库就是部分基因,其中CDNA文库是反转录DNA文库,属于部分DNA文库.基因克隆是在体外的DNA复制过程,叫聚合酶链式反
首先根据蛋白性质及实验要求选择表达载体,比如是原核还是真核表达,是否加标签,是否控制表达位置及强度等.然后根据载体和目的蛋白设计引物,要考虑加酶切位点,保护碱基等.其次选择合适组织提取RNA,RT-P
通过LongPCR等技术首次克隆得到全长9388bp的牛催乳素(bPRL)基因组序列(GenBank登录号AF426315),其中包括bPRL基因全部5个外显子和4个内含子,5′端854bp的上游调控
1,到genebank里面找到几个近缘种的该基因序列,用序列软件(例如DNAMAN)比对一下,在相对保守的区域设计成对引物.2,查阅一些文献,看要克隆的该基因在哪种组织里面表达量高.然后提取该组织或部
有些是有些不是,上面有注明的,你仔细看就知道了.有的写出了内含子和外显子.
1.首先这应该是个融合表达载体.应该考虑后面的读码框问题.就是应该适当在后面的酶切位点前加入0-2个碱基.使得你的目的基因和egfp在同一读码框内.2.KOZAK序列在真核细胞中表达有作用,这就看你后
原核:5'有对应RNASD序列的片断,包含多个ORF真核:ORF中没有内含子,3'有对应Poly(A)的TTTTTTT,另外:不管是原核还是真核,其两端一定有5'UTR及3'UTR,这也是我们要作RA
你找的14a在这里,通过上下游的碱基搜索就可以了.可以根据mRNA序列设计引物,扩增gDNA,但必须注意,引物必须在同一个exon上.如果扩增的片段跨了一个或几个intron,还要用到longPCR的
1.测序最好克隆到载体后进行,比直接测PCR产物好2.测序短,说明你的样本里有抑制剂,比如EDTA等.样本要用水稀释,不能含有抑制剂3.同源性只有34%,说明不是同一种属的.4.如果有好几个,那你可以
1先根据部分序列设计一对引物验证一下序列是否正确(很确信就免),需要的话克隆,有文库的话杂一下文库;2根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列;3同时设计巢氏引物,进行3’RACE
都不知道你已学了什么生物信息学知识,怎么回答?如别人前面回答的,可以定位位置,可以了解诶内含子,了解cDNA对应gDNA有多长,可以从cDNA翻译得到蛋白质,可以分析推算出来的蛋白质序列的一些性质,比
ncbi序列既有cDNA序列也有mRNA序列,一般会有注释的.如果已经说明是mRNA就不可能是cDNA.mRNA是以正义链的形式给出的,所以是T而不是U.这可能是因为序列提交者一般只对DNA测序,而很
cDNA是双链DNA.其中cDNA第一链是和mRNA互补的,另一链是相同的.再问:请问NCBI上的cDNA序列,列出的是和mRNA相同的吗?我查了一个基因,显示cDNA只和mRNA内的部分相同。cDN
cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞.每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布.特点是:①
你是通过提RNA来得到基因的吧.cDNA是RNA逆转录成的DNA序列,与基因组相比没有内含子,就是说它是可以表达或者在表达的基因.
mRNA反转录后就是cDNA,CDS也就是orf,翻译蛋白的部分5'utr-CDS-3'utr就是cDNA了嘛,cDNA包含有CDS
我认为有必要上传,毕竟品种不一样,上传的时候标记清楚即可