为什么要求加入氨性缓冲液前,要先加入一部分EDTA
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/21 10:28:34
缓冲液是固定PH的,加5ML就够了啊
邻二氮菲与亚铁离子络合物才稳定.预先加入盐酸羟胺是为了还原铁离子(以免测量结果偏小);加缓冲液是为了调节并稳定PH在5左右,此PH下邻二氮菲与亚铁离子络合最稳定,反应速率也能大幅提高.
重铬酸钾的氧化作用是:Cr2O72-+6e+14H+=2Cr3++7H2O,加入硫酸是提供酸性环境,增强氧化能力.不能用盐酸,盐酸的氯离子有还原性,能和重铬酸钾反应:Cr2O72-+6Cl-+14H+
缓冲液是为了保护样品不在电泳过程中被破坏或变性,同时可以提供一个比较稳定的电泳环境.电泳是可以用来分离不同大小DNA的,也许是你的DNA之间大小的差别不够大,你可以尝试一下提高胶的浓度、延长电泳时间(
DNA上样缓冲液里有SDS吗?一般只是EDTA,甘油和溴酚蓝啊.如果加SDS问题也不大,估计是能将样品里可能含有的DNA结合蛋白给变性解离了吧.DNA带强负电,与SDS不会结合的.
朋友,看来你们也是用PH计测定PH值,使用PH计的标准操作就是使用酸碱校正液校正后再测,这是标准操作,其实有时候我们也不调,但长时间在电极保护液中的感应头,PH值会有一定的变化.
HgCl2是催化剂,而且反应的量也并不容易控制,当然需要降温了.其实这个方法并不好,一是HgCl2有毒,污染环境,二是又加HgCl2又加SnCl2的,太麻烦,而且很容易过量.不如用硫氰酸盐比法色.
透析是利用半透性膜将待纯化蛋白质包裹,沉浸在缓冲液中;由于缓冲液浓度低于膜内部的浓度,因此在半透膜上会发生物质交换;但蛋白质不能通过半透膜,只有盐离子等小分子物质可以通过;因此,待纯化蛋白质中的盐杂质
1,容易配制,经济方便;2,受温度影响小,缓冲能力强;3,对大部分蛋白和酶的结构及活性没影响,便于后续实验.需要指出的是,不是所有的酶都适用于磷酸缓冲液,如某些以磷酸根为底物的酶.
加入HAc-NaAc缓冲液,是稳定PH值.应该是用二甲酚橙为指示剂
pH=10再问:为什么呢再答:pH=10istheminimumpHforCa2+,Mg2+completelytobindwithEDTA.oratpH=10,conditionalformatio
重氮盐的制备要在强酸性环境中进行,以免生成的重氮盐与未反应的芳胺偶联,故不用加氢氧化钠,但甲基橙的制备中,这一步所用芳胺(对氨基苯磺酸)较为特殊,酸性很强、碱性很弱,故需用氢氧化钠使其溶解,然后将其与
磷酸可以络合三价铁,络合物水溶液无色,这样就可以消除滴定的时候终点指示颜色的干扰.
缓冲液中的盐离子(Na)中和RNA/DNA主链上的负电荷,使其呈电中性,这样可以使探针和把序列的结合比较容易进行.
柠檬酸易被空气氧化.
在不同ph下,EDTA的络合能力是不同的,加入氨缓冲液,为了增加络合能力,也为了避免其它金属离子的干扰,加NaOH是调节ph,有的溶液酸度强,就先加2滴NaOH再加氨缓冲液.
钙离子易水解,加氨性缓冲液,抑制其水解,减小误差
1,是为了使没发挥更好的活性,2,不可以用蒸馏水,因为蒸馏水的PH不等于7.会令酶降低活性!
缓冲液的作业是为蛋白分子提供温和的环境,包括适宜的ph,离子强度等,防止蛋白变性.酶是比较脆弱的蛋白质,外部环境的改变很容易造成酶分子的变性,使目标酶的有效提取率下降.缓冲液主要是可以提供稳定其结构的
移动液吸取精度高,对水样来说,直接影响测量误差.而缓冲液,则要求不高,以为缓冲液里存在一种平衡,就算加入缓冲液的量偏差点,也会发生平衡移动,对结果没什么影响.